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    本項(xiàng)目以獸藥氨苯砜和病原微生物為研究對(duì)象，綜合運(yùn)用生物、材料、光譜、化學(xué)等多學(xué)科前沿科學(xué)技術(shù)，對(duì)抗體制備技術(shù)、免疫標(biāo)記技術(shù)、固相膜免疫檢測(cè)技術(shù)、基質(zhì)屏蔽技術(shù)等一系列關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行攻關(guān)研究，系統(tǒng)開(kāi)發(fā)快速免疫檢測(cè)產(chǎn)品，滿足實(shí)際檢測(cè)中對(duì)定性及定量快速檢測(cè)的需求，開(kāi)發(fā)系列化檢測(cè)產(chǎn)品；利用LAMP技術(shù)的原理制成環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)食品病原菌的試紙條，并利用試紙條實(shí)現(xiàn)食品病原菌的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè),同時(shí)研究試紙條冷凍干燥條件及工藝參數(shù)，對(duì)其檢測(cè)效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。為食品中獸藥殘留和病原微生物檢測(cè)提供高效、快速、系列化的檢測(cè)技術(shù)。
項(xiàng)目來(lái)源: 河北省科技計(jì)劃項(xiàng)目。項(xiàng)目名稱：食品中砜類抑菌劑及病原微生物快速檢測(cè)技術(shù)研究；項(xiàng)目編號(hào)：152776120D；立項(xiàng)日期：2015年1月1日；結(jié)題日期：2017年12月31日；項(xiàng)目說(shuō)明：項(xiàng)目完成單位為河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，項(xiàng)目完成人：劉衛(wèi)華，苑寧，李慧，王向紅, 王羽，鄭小嬌，張晶，張偉，李紅衛(wèi)。技術(shù)領(lǐng)域：食品安全檢測(cè)；應(yīng)用領(lǐng)域：食品中氨苯砜及病原菌的快速檢測(cè)。

    1.技術(shù)創(chuàng)新程度。本研究對(duì)抗體制備技術(shù)、免疫標(biāo)記技術(shù)、固相膜免疫檢測(cè)技術(shù)、基質(zhì)屏蔽技術(shù)等一系列關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行攻關(guān)研究，取得技術(shù)突破、掌握核心技術(shù)，并建立兩種氨苯砜快速免疫檢測(cè)分析方法；同時(shí)利用LAMP技術(shù)的原理制成環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)食品病原菌的試紙條，并研究比較了幾種不同的試驗(yàn)結(jié)果的可視化效果，使檢驗(yàn)更準(zhǔn)確便捷，實(shí)現(xiàn)多項(xiàng)技術(shù)創(chuàng)新。
2.技術(shù)指標(biāo)的先進(jìn)程度。在免疫分析方法的研究中，確立快速、靈敏的氨苯砜ELISA檢測(cè)方法，檢測(cè)靈敏度達(dá)到0.02 μg/L；膠體金標(biāo)記試紙條檢測(cè)方法的最低檢出限為20 μg/L。檢測(cè)時(shí)間均≤2hr，符合快速檢測(cè)的需求。 開(kāi)發(fā)出環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試紙條法檢測(cè)食品中七種病原菌的試紙條,七種病原菌的檢出限為4.8cfu/g(ml)，從樣品處理到報(bào)告結(jié)果，整個(gè)過(guò)程在20分鐘之內(nèi)完成。

    以獸藥氨苯砜為研究對(duì)象，對(duì)抗體制備技術(shù)、免疫標(biāo)記技術(shù)、固相膜免疫檢測(cè)技術(shù)、基質(zhì)屏蔽技術(shù)等一系列關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行攻關(guān)研究，完成了氨苯砜人工抗原的合成與抗體的制備，建立了氨苯砜直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法建立并經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；研究出氨苯砜膠體金標(biāo)記試紙條檢測(cè)方法。對(duì)于樣品基質(zhì)干擾的技術(shù)難題，在課題人員不斷努力的重復(fù)和試驗(yàn)下，終于在機(jī)制消除這一問(wèn)題上得到了解決，實(shí)現(xiàn)了較高的加標(biāo)回收率。 以病原微生物為研究對(duì)象，將LAMP技術(shù)應(yīng)用于固相載體，制成LAMP技術(shù)檢測(cè)食品中七種病原菌的試紙條；研究了LAMP反應(yīng)體系在液相環(huán)境中長(zhǎng)久貯存的方法；建立了LAMP技術(shù)檢測(cè)變形桿菌的快速可視化方法，利用鈣黃綠素作為指示劑，具有良好的特異性，靈敏度達(dá)到4.8CFU/mL。

    食品中病原菌傳統(tǒng)檢測(cè)方法繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)，而環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（LAMP）可以高效、快速、特異的檢出食品中的病原菌，但仍不能滿足基層單位和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的需要，因此急需改進(jìn)LAMP檢測(cè)技術(shù)，研制環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)食品病原菌的試紙條，使其操作更加簡(jiǎn)便，耗時(shí)更短，能夠在現(xiàn)場(chǎng)完成檢測(cè)，可在基層廣泛推廣應(yīng)用。在免疫分析方法的研究中，確立快速、靈敏的氨苯砜的ELISA檢測(cè)方法，檢測(cè)靈敏度達(dá)μg/kg級(jí)，膠體金標(biāo)記試紙條檢測(cè)方法的最低檢出限達(dá)20 μg/L，檢測(cè)時(shí)間≤2hr，符合快速檢測(cè)的需求；環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試紙條法檢測(cè)食品中七種病原菌,檢出限為4.8 cfu/g(ml)，從樣品處理到報(bào)告結(jié)果在20分鐘之內(nèi)完成。方法穩(wěn)定性較高、特異性強(qiáng)，效果較好。氨苯砜的ELISA檢測(cè)方法，檢測(cè)靈敏度達(dá)到μg/kg級(jí)；膠體金標(biāo)記試紙條檢測(cè)方法的最低檢出限為20 μg/L，檢測(cè)時(shí)間均≤2hr。環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試紙條法檢測(cè)食品中七種病原菌，檢出限為4.8 cfu/g(ml)，20分鐘之內(nèi)完成，滿足現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的需求。

    本研究對(duì)抗體制備技術(shù)、免疫標(biāo)記技術(shù)、固相膜免疫檢測(cè)技術(shù)、基質(zhì)屏蔽技術(shù)等一系列關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行攻關(guān)研究，取得技術(shù)突破、掌握核心技術(shù)，并建立兩種氨苯砜快速免疫檢測(cè)分析方法；同時(shí)利用LAMP技術(shù)的原理制成環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)食品病原菌的試紙條，并研究比較了幾種不同的試驗(yàn)結(jié)果的可視化效果，使檢驗(yàn)更準(zhǔn)確便捷，實(shí)現(xiàn)多項(xiàng)技術(shù)創(chuàng)新。在免疫分析方法的研究中，確立快速、靈敏的氨苯砜的ELISA檢測(cè)方法，檢測(cè)靈敏度達(dá)μg/kg級(jí)，膠體金標(biāo)記試紙條檢測(cè)方法的最低檢出限達(dá)20 μg/L，檢測(cè)時(shí)間≤2hr，符合快速檢測(cè)的需求；環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試紙條法檢測(cè)食品中七種病原菌,檢出限為4.8 cfu/g(ml)，從樣品處理到報(bào)告結(jié)果在20分鐘之內(nèi)完成。方法穩(wěn)定性較高、特異性強(qiáng)，經(jīng)應(yīng)用，效果較好。氨苯砜的ELISA檢測(cè)方法，檢測(cè)靈敏度達(dá)到μg/kg級(jí)；膠體金標(biāo)記試紙條檢測(cè)方法的最低檢出限為20 μg/L，檢測(cè)時(shí)間均≤2hr。環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試紙條法檢測(cè)食品中七種病原菌，檢出限為4.8 cfu/g(ml)，20分鐘之內(nèi)完成，滿足現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)工作中對(duì)快速檢測(cè)的需求。

    本研究對(duì)抗體制備技術(shù)、免疫標(biāo)記技術(shù)、固相膜免疫檢測(cè)技術(shù)、基質(zhì)屏蔽技術(shù)等一系列關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行攻關(guān)研究，取得技術(shù)突破、掌握核心技術(shù)，并建立兩種氨苯砜快速免疫檢測(cè)分析方法；同時(shí)利用LAMP技術(shù)的原理制成環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)食品病原菌的試紙條，并研究比較了幾種不同的試驗(yàn)結(jié)果的可視化效果，使檢驗(yàn)更準(zhǔn)確便捷，實(shí)現(xiàn)多項(xiàng)技術(shù)創(chuàng)新。在免疫分析方法的研究中，確立快速、靈敏的氨苯砜的ELISA檢測(cè)方法，檢測(cè)靈敏度達(dá)μg/kg級(jí)，膠體金標(biāo)記試紙條檢測(cè)方法的最低檢出限達(dá)20 μg/L，檢測(cè)時(shí)間≤2hr，符合快速檢測(cè)的需求；環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試紙條法檢測(cè)食品中七種病原菌,檢出限為4.8 cfu/g(ml)，從樣品處理到報(bào)告結(jié)果在20分鐘之內(nèi)完成。方法穩(wěn)定性較高、特異性強(qiáng)，經(jīng)應(yīng)用，效果較好。氨苯砜的ELISA檢測(cè)方法，檢測(cè)靈敏度達(dá)到μg/kg級(jí)；膠體金標(biāo)記試紙條檢測(cè)方法的最低檢出限為20 μg/L，檢測(cè)時(shí)間均≤2hr。環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試紙條法檢測(cè)食品中七種病原菌，檢出限為4.8 cfu/g(ml)，20分鐘之內(nèi)完成，滿足現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)工作中對(duì)快速檢測(cè)的需求。

    本項(xiàng)目以獸藥氨苯砜和病原微生物為研究對(duì)象，綜合運(yùn)用生物、材料、光譜、化學(xué)等多學(xué)科前沿科學(xué)技術(shù)，對(duì)抗體制備技術(shù)、免疫標(biāo)記技術(shù)、固相膜免疫檢測(cè)技術(shù)、基質(zhì)屏蔽技術(shù)等一系列關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行攻關(guān)研究，系統(tǒng)開(kāi)發(fā)快速免疫檢測(cè)產(chǎn)品，滿足實(shí)際檢測(cè)中對(duì)定性及定量快速檢測(cè)的需求，開(kāi)發(fā)系列化檢測(cè)產(chǎn)品；利用LAMP技術(shù)的原理制成環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)食品病原菌的試紙條，并利用試紙條實(shí)現(xiàn)食品病原菌的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè),同時(shí)研究試紙條冷凍干燥條件及工藝參數(shù)，對(duì)其檢測(cè)效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。為食品中獸藥殘留和病原微生物檢測(cè)提供高效、快速、系列化的檢測(cè)技術(shù)。
氨苯砜的ELISA檢測(cè)方法，檢測(cè)靈敏度達(dá)到μg/kg級(jí)；膠體金標(biāo)記試紙條檢測(cè)方法的最低檢出限為20 μg/L，檢測(cè)時(shí)間均≤2hr。環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增試紙條法檢測(cè)食品中七種病原菌，檢出限為4.8 cfu/g(ml)，20分鐘之內(nèi)完成，滿足現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)工作中對(duì)快速檢測(cè)的需求。

    以獸藥氨苯砜和病原微生物為研究對(duì)象，綜合運(yùn)用生物、材料、光譜、化學(xué)等多學(xué)科前沿科學(xué)技術(shù)，對(duì)抗體制備技術(shù)、免疫標(biāo)記技術(shù)、固相膜免疫檢測(cè)技術(shù)、基質(zhì)屏蔽技術(shù)等一系列關(guān)鍵技術(shù)進(jìn)行攻關(guān)研究，系統(tǒng)開(kāi)發(fā)快速免疫檢測(cè)產(chǎn)品，滿足實(shí)際檢測(cè)中對(duì)定性及定量快速檢測(cè)的需求，開(kāi)發(fā)系列化檢測(cè)產(chǎn)品；利用LAMP技術(shù)的原理制成環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)食品病原菌的試紙條，并利用試紙條實(shí)現(xiàn)食品病原菌的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè),同時(shí)研究試紙條冷凍干燥條件及工藝參數(shù)，對(duì)其檢測(cè)效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。為食品中獸藥殘留和病原微生物檢測(cè)提供高效、快速、系列化的檢測(cè)技術(shù)。
本技術(shù)需要培育新的市場(chǎng)。產(chǎn)品定價(jià)：成本+利潤(rùn)。成本包括研發(fā)費(fèi)用、原材料、人力成本、推廣宣傳成本等。銷售渠道：計(jì)劃采用“傳統(tǒng)市場(chǎng)渠道+電子商務(wù)渠道“的形式。在傳統(tǒng)市場(chǎng)渠道方面，針對(duì)單位用戶和個(gè)人用戶，采用不同的推銷方式；建立體驗(yàn)門(mén)店。大力發(fā)展電子商務(wù)銷售模式。產(chǎn)品推廣模式：客戶試用，客戶評(píng)分，反饋信息，客戶體驗(yàn)分享。組織各種展銷會(huì)和市場(chǎng)推廣活動(dòng)，使快速檢測(cè)產(chǎn)品深入人心，人人知曉，家家可用，人人會(huì)用。目前沒(méi)有典型的試用客戶。